Ultra Nuclease GMP-βαθμού
Αριθμός γάτας: HC2016A
UltraNuclease GMP-βαθμού εκφράζεται και καθαρίζεται σε Escherichia coli (E.coli) με γενετική μηχανική και παρασκευή σε περιβάλλοντα GMP.Μπορεί να μειώσει το ιξώδες του κυτταρικού υπερκειμένου και του κυτταρολύματος στην επιστημονική έρευνα, να αυξήσει την αποτελεσματικότητα καθαρισμού πρωτεϊνών και να ενισχύσει τη λειτουργική έρευνα πρωτεϊνών.Το προϊόν μπορεί επίσης να μειώσει τα υπολείμματα νουκλεϊκού οξέος του ξενιστή σε βαθμό pg, βελτιώνοντας την απόδοση και την ασφάλεια των βιολογικών προϊόντων εφαρμογών, συμπεριλαμβανομένου του καθαρισμού ιών, της παρασκευής εμβολίων και της φαρμακευτικής παραγωγής πρωτεϊνών/πολυσακχαριτών.Επιπλέον, το προϊόν μπορεί επίσης να εφαρμοστεί για την πρόληψη της συσσώρευσης μονοπύρηνων κυττάρων ανθρώπινου περιφερικού αίματος (PBMC) στην κυτταρική θεραπεία και την ανάπτυξη εμβολίων.
Η UltraNuclease παρέχεται με τη μορφή ενός αποστειρωμένου αντιδραστηρίου, που εκλούεται σε ρυθμιστικό διάλυμα (20 mM Tris-HCL ρΗ 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% γλυκερίνη), με την εμφάνιση ενός άχρωμου, διαφανούς υγρού.Αυτό το προϊόν παράγεται σύμφωνα με τις απαιτήσεις της διαδικασίας GMP και παρέχεται σε υγρή μορφή.
Συστατικά
UltraNuclease GMP-βαθμού (250 U/μL)
Συνθήκες αποθήκευσης
Το προϊόν αποστέλλεται με ξηρό πάγο και μπορεί να αποθηκευτεί στους -25℃~-15°C για δύο χρόνια.
Εάν το προϊόν είναι ανοιχτό και έχει αποθηκευτεί στους 4℃ για περισσότερο από μία εβδομάδα, συνιστούμε το φιλτράρισματο προϊόν για την πρόληψη της μικροβιακής μόλυνσης.
Προδιαγραφές
| Κεντρικός υπολογιστής έκφρασης | Ανασυνδυασμένο E. coli με γονίδιο UltraNuclease |
| Μοριακό βάρος | 26,5 kDa |
| ηλεκτροηλεκτρικό σημείο | 6,85 |
| Καθαρότητα | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Buffer αποθήκευσης | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% γλυκερίνη |
|
Ορισμός μονάδας | Ο ορισμός μιας μονάδας δραστηριότητας (U) είναι η ποσότητα του ενζύμου που χρησιμοποιείται γιααλλάξτε την τιμή απορρόφησης του ΔA260 κατά 1,0 σε 30 λεπτά σε 2.625 mLσύστημα αντίδρασης στους 37℃ με pH 8,0 (ισοδύναμο με την πλήρη πέψη του37 μg DNA σπέρματος σολομού σε ολιγονουκλεοτίδια). |
Οδηγίες
1. Δείγμα Συλλογή
Προσκολλημένα κύτταρα: αφαιρέστε το μέσο, πλύνετε τα κύτταρα με PBS και αφαιρέστε το υπερκείμενο.
Κύτταρα εναιωρήματος: συλλέγονται τα κύτταρα με φυγοκέντρηση, πλένονται τα κύτταρα με PBS, φυγοκεντρούνται στους 6.000rpm για 10 λεπτά, συλλέξτε το σφαιρίδιο.
Escherichia coli: συλλέγονται τα βακτήρια με φυγοκέντρηση, πλένονται μία φορά με PBS, φυγοκεντρούνται στους 8.000rpm για 5 λεπτά και συλλέξτε το σφαιρίδιο.
2. Θεραπεία δείγματος
Επεξεργαστείτε τα συλλεχθέντα σφαιρίδια κυττάρων με ρυθμιστικό διάλυμα λύσης στην αναλογία μάζας (g) προς όγκο (mL) 1: (10-20) ή με μηχανικές ή χημικές μεθόδους σε πάγο ή σε θερμοκρασία δωματίου (1 g σφαιριδίου κυττάρων περιέχει περίπου
109 κύτταρα).
3. Ενζυμική Θεραπεία
Προσθέστε 1-5 mM MgCl στο σύστημα αντίδρασης και ρυθμίστε το pH στο 8-9.
Προσθέστε UltraNuclease σύμφωνα με την αναλογία 250 μονάδων για να αφομοιώσετε 1 g σφαιριδίων κυττάρων, επωάστε στους 37℃ για περισσότερα από 30 λεπτά.Ανατρέξτε στη φόρμα «Προτεινόμενος χρόνος αντίδρασης» για να επιλέξετε τοδιάρκεια της θεραπείας.
4. Υπερκείμενο Συλλογή
Φυγοκεντρήστε στις 12.000 rpm για 30 λεπτά και συλλέξτε το υπερκείμενο.
Σημείωση: Εάν το διάλυμα είναι όξινο ή αλκαλικό ή περιέχει υψηλές συγκεντρώσεις αλατιού, απορρυπαντικών ήμετουσιωτικά, αυξήστε τη δόση του ενζύμου ή παρατείνετε τον χρόνο θεραπείας ανάλογα.
Συνιστώμενες συνθήκες αντίδρασηςons
| Παράμετρος | Βέλτιστη Κατάσταση | Αποτελεσματική Κατάσταση |
| Mg²+Συγκέντρωση | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Θερμοκρασία | 37℃ | 0-42℃ |
| Συγκέντρωση DTT | 0-100 mM | >0 mM |
| Συγκέντρωση μερκαπτοαιθανόλης | 0-100 mM | >0 mM |
| Συγκέντρωση μονοσθενούς κατιόντος | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Συγκέντρωση φωσφορικού άλατος | 0-10 mM | 0-100 mM |
Συνιστάται Αντίδραση χρόνος (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Ποσότητα UltraNuclease (τελική συγκέντρωση) | Χρόνος αντίδρασης |
| 0,25 U/mL | >10 h |
| 2,5 U/mL | > 4 ώρες |
| 25 U/mL | 30 λεπτά |
Σημειώσεις:
Φορέστε τα απαραίτητα ΜΑΠ, όπως παλτό εργαστηρίου και γάντια, για να διασφαλίσετε την υγεία και την ασφάλειά σας!
