Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Περιγραφή
Αριθμός γάτας: HCR5141A
Το Multiplex One Step RT-qPCR Premix είναι ένα πολυπλεξικό κιτ ποσοτικής PCR που βασίζεται στο RNA ως πρότυπο.Στο πείραμα, η αντίστροφη μεταγραφή και η ποσοτική PCR πραγματοποιούνται στον ίδιο σωλήνα αντίδρασης, απλοποιώντας την πειραματική λειτουργία και μειώνοντας τον κίνδυνο μόλυνσης.Ο μοναδικός σχεδιασμός του ρυθμιστικού διαλύματος και του μίγματος ενζύμων μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε λυοφιλοποιημένο σύστημα ενός σταδίου.Το κιτ χρησιμοποιεί αντίστροφη μεταγραφάση ανθεκτική στη θερμότητα για αποτελεσματική σύνθεση του πρώτου κλώνου cDNA χρησιμοποιώντας πολυμεράση Taq DNA hotstart για ποσοτική ενίσχυση.Περιέχει βελτιστοποιημένο ρυθμιστικό διάλυμα αντίδρασης, μείγμα ενζύμων κ.λπ., και προστέθηκαν παράγοντες που αναστέλλουν αποτελεσματικά την μη ειδική ενίσχυση PCR και ενισχύουν την αποτελεσματικότητα ενίσχυσης πολλαπλών αντιδράσεων qPCR, επιτρέποντας ποσοτική ενίσχυση πολλαπλού φθορισμού ενώ διασφαλίζεται η αποτελεσματικότητα ενίσχυσης των εκκινητών.
Συστατικά
Ονομα |
1. Lyo-Buffer |
2. Μίγμα Lyo-Enzyme |
3. Προστατευτικό Lyo |
Κατάσταση μεταφοράςιόν
Α: Λυο-ρυθμιστικό και προστατευτικό: -25~-15℃, η διάρκεια ζωής είναι 1 έτος.
Β: Μίγμα Lyo-enzyme, 2-8 ℃, η διάρκεια ζωής είναι 6 μήνες.
Οδηγίες λειτουργίας
1. Σύστημα Αντίδρασης (Ας πάρουμε για παράδειγμα 25μL)
Συστατικά | Όγκος (μL) | Τελική Συγκέντρωση |
Lyo-Buffer | 6 | 1* |
Μίγμα Lyo-Enzyme | 1 | - |
Lyo-Protectant | 8 | - |
Μίγμα Primer (10μM) | 1 | 0,1- 1uM |
Μείγμα ανιχνευτή (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
Πρότυπο RNA | 5 | - |
DEPC H2O | Έως 25 | - |
2. Βελτιστοποιημένο Πρωτόκολλο Ποδηλασίας
1) Standard Cycling Protocol
Στάδιο αντίδρασης | Θερμοκρασία | χρόνος | Κύκλος | |
1 | Αντίστροφη μεταγραφή | 50°Ca | 10 λεπτά | 1 |
2 | Αρχική μετουσίωση | 95°C | 5 λεπτά | 1 |
3 | Αντίδραση ενίσχυσης | 95°C | 15 δευτ | 45 κύκλοι |
60°Cb | 30 δευτc |
2) Πρωτόκολλο Fast Cycling
| Στάδιο αντίδρασης | Θερμοκρασία | χρόνος | Κύκλος |
1 | Αντίστροφη μεταγραφή | 50°Ca | 2 λεπτά | 1 |
2 | Αρχική μετουσίωση | 95°C | 2 δευτ | 1 |
3 | Αντίδραση ενίσχυσης | 95°C | 1 δευτερόλεπτο |
45 κύκλοι |
60°Cb | 13 δευτc |
Σημείωση:
a) ΑΝΤΙΣΤΡΟΦΗ μεταγραφή: Η θερμοκρασία μπορεί να επιλέξει 42°C ή 50°C για 10-15 λεπτά.
b) Αντίδραση ενίσχυσης: Η θερμοκρασία ρυθμίζεται σύμφωνα με την τιμή Tm των σχεδιασμένων ασταριών.
ντο)Φθορισμός σήμα απόκτηση: Ρυθμίστε την πειραματική διαδικασία σύμφωνα με τις απαιτήσεις τουεγχειρίδιο οργάνων.
Τεχνικές Πληροφορίες/Προδιαγραφές
Hot Start | Ενσωματωμένο hot start |
Μέθοδος ανίχνευσης | Ανίχνευση ασταριού-ανιχνευτή |
Μέθοδος PCR | Ένα βήμα RT-qPCR |
Τύπος δείγματος | RNA |
Σημειώσεις
1. Αυτό το προϊόν προορίζεται μόνο για ερευνητική χρήση.
2. Φορέστε τα απαραίτητα ΜΑΠ, όπως παλτό εργαστηρίου και γάντια, για να διασφαλίσετε την υγεία και την ασφάλειά σας!