Bst 2.0 DNA Πολυμεράση (χωρίς γλυκερόλη, υψηλής πυκνότητας)
Η Bst DNA πολυμεράση V2 προέρχεται από Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, η οποία έχει δραστικότητα 5'→3' DNA πολυμεράσης και ισχυρή δράση αντικατάστασης αλυσίδας, αλλά όχι 5'→3' δράση εξωνουκλεάσης.Το Bst DNA Polymerase V2 είναι ιδανικά κατάλληλο για μετατόπιση κλώνου, ισοθερμική ενίσχυση LAMP (Ισοθερμική ενίσχυση μέσω βρόχου) και ταχεία αλληλούχιση.Αυτή η Bst DNA πολυμεράση V2 είναι ικανή να αναστέλλει τη δραστηριότητα της DNA πολυμεράσης σε θερμοκρασία δωματίου, έτσι ώστε να μπορεί να λειτουργήσει και το σύστημα αντίδρασης να διαμορφωθεί σε θερμοκρασία δωματίου, αποτρέποντας τη μη ειδική ενίσχυση και βελτιώνοντας την αποτελεσματικότητα της αντίδρασης, και αυτή η έκδοση μπορεί να λυοφιλοποιηθούν.Επιπλέον, είναι σε θέση να απελευθερώνει τη δραστηριότητά του σε υψηλές θερμοκρασίες, εξαλείφοντας έτσι την ανάγκη για ένα ξεχωριστό βήμα ενεργοποίησης.
Συστατικά
| Συστατικό | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA πολυμεράση V2 (χωρίς γλυκερόλη) (32U/μL) | 0,05 mL | 0,25 mL | 2,5 mL |
| Ρυθμιστικό διάλυμα 10×HC Bst V2 | 1,5 mL | 2×1,5 mL | 3×10 mL |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 mL | 2×1,5 mL | 2×10 mL |
Εφαρμογές
1.Ισοθερμική ενίσχυση LAMP
2.Αντίδραση μονής μετατόπισης κλώνου DNA
3.Αλληλουχία γονιδίου υψηλού GC
4.Αλληλουχία DNA σε επίπεδο νανογραμμάτων.
Κατάσταση Αποθήκευσης
Μεταφορά κάτω από 0°C και αποθήκευση στους -25°C~-15°C.
Ορισμός μονάδας
Μία μονάδα ορίζεται ως η ποσότητα του ενζύμου που ενσωματώνει 25 nmol dNTP σε αδιάλυτο σε οξύ υλικό σε 30 λεπτά στους 65°C.
ΛΑΜΠΑ Αντίδραση
| Συστατικά | 25 μLΣύστημα |
| Ρυθμιστικό διάλυμα 10×HC Bst V2 | 2,5 μL |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 μL |
| dNTP (10mM το καθένα) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Πράσινο (25×)a | 1,0 μL |
| Μίγμα ασταριούb | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (χωρίς γλυκερόλη) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Πρότυπο | × μL |
| ddH2O | Έως 25 μL |
Σημειώσεις:
1) α.SYTOTM 16 Πράσινο (25×): Σύμφωνα με τις πειραματικές ανάγκες, άλλες βαφές μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως υποκατάστατα.
2) β.Μίγμα εκκινητών: λαμβάνεται με ανάμιξη 20 μΜ FIP, 20 μΜ ΒΙΡ, 2,5 μΜ F3, 2,5 μΜ Β3, 5 μΜ LF, 5 μΜ LB και άλλων όγκων.
Αντίδραση και Κατάσταση
Ρυθμιστικό διάλυμα 1 × HC Bst V2, η θερμοκρασία επώασης είναι μεταξύ 60°C και 65°C.
Απενεργοποίηση θερμότητας
80°C, 20 λεπτά.
