Υπεροξειδάση (πηγή χρένο) Συνώνυμο: Οξειδορεδουκτάση υπεροξειδίου του υδρογόνου;HRP

Η υπεροξειδάση του χρένου (HRP) απομονώνεται από τις ρίζες του χρένου (Amoracia rusticana) και ανήκει στην ομάδα των υπεροξειδασών της σιδηροπρωτοπορφυρίνης.Το HRP συνδυάζεται εύκολα με το υπεροξείδιο του υδρογόνου (H2O2).Το προκύπτον σύμπλοκο [HRP-H2O2] μπορεί να οξειδώσει μια μεγάλη ποικιλία δοτών υδρογόνου:
Δότης + Η2Ο2 → Οξειδωμένος Δότης + 2 Η2Ο
Το HRP θα οξειδώσει διάφορα υποστρώματα (βλ. Πίνακα 1):
• Χρωμογενές
• Χημειοφωταύγεια (όπως λουμινόλη ή ισολουμινόλη)
• Φθορογόνο (όπως τυραμίνη, ομοβανιλικό οξύ ή 4-υδροξυφαινυλοοξικό οξύ)
Το HRP είναι ένα πολυπεπτίδιο μονής αλυσίδας που περιέχει τέσσερις δισουλφιδικές γέφυρες.Το HRP είναι μια γλυκοπρωτεΐνη που περιέχει 18% υδατάνθρακες.Η σύνθεση υδατανθράκων αποτελείται από γαλακτόζη, αραβινόζη, ξυλόζη, φουκόζη, μαννόζη, μαννοζαμίνη και γαλακτοζαμίνη, ανάλογα με το συγκεκριμένο ισοένζυμο.

Το HRP είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη ετικέτα για ανοσοσφαιρίνες σε πολλές διαφορετικές εφαρμογές ανοσοχημείας, συμπεριλαμβανομένης της ανοσοστύπωσης, της ανοσοϊστοχημείας και της ELISA.Το HRP μπορεί να συζευχθεί με αντισώματα με πολλές διαφορετικές μεθόδους, συμπεριλαμβανομένης της γλουταραλδεΰδης, της υπεριωδικής οξείδωσης, μέσω δισουλφιδικών δεσμών και επίσης μέσω διασταυρούμενων δεσμών κατευθυνόμενων από αμινο και θειόλη.Η HRP είναι η πιο επιθυμητή ετικέτα για τα αντισώματα, καθώς είναι η μικρότερη και πιο σταθερή από τις τρεις πιο δημοφιλείς ενζυμικές ετικέτες (υπεροξειδάση, β-γαλακτοσιδάση, αλκαλική φωσφατάση) και η γλυκοζυλίωση της οδηγεί σε χαμηλότερη μη ειδική δέσμευση.Μια ανασκόπηση των μεθόδων σύζευξης γλουταραλδεΰδης και υπεριωδικού έχει δημοσιευτεί.

Η υπεροξειδάση χρησιμοποιείται επίσης για τον προσδιορισμό της γλυκόζης4 και των υπεροξειδίων στο διάλυμα.Αρκετές δημοσιεύσεις, 6-24 διατριβές, 25-29 και διατριβές 30-46 έχουν αναφέρει τη χρήση του P8375 στα ερευνητικά τους πρωτόκολλα.