Δεοξυριβονουκλεάση I (Dnase I)
Περιγραφή
Η DNase I (Δεοξυριβονουκλεάση Ι) είναι μια ενδοδεοξυριβονουκλεάση που μπορεί να αφομοιώσει το μονόκλωνο ή δίκλωνο DNA.Αναγνωρίζει και διασπά φωσφοδιεστερικούς δεσμούς για την παραγωγή μονοδεοξυνουκλεοτιδίων ή μονόκλωνων ή δίκλωνων ολιγοδεοξυνουκλεοτιδίων με φωσφορικές ομάδες στο 5'-άκρο και υδροξύλιο στο 3'-άκρο.Η δραστικότητα της DNase I εξαρτάται από το Ca 2+ και μπορεί να ενεργοποιηθεί από δισθενή ιόντα μετάλλων όπως Mn 2+ και Zn 2+.Το 5 mM Ca 2+ προστατεύει το ένζυμο από την υδρόλυση.Παρουσία Mg 2+, το ένζυμο μπορούσε τυχαία να αναγνωρίσει και να διασπάσει οποιαδήποτε θέση σε οποιονδήποτε κλώνο DNA.Παρουσία Mn2+, οι διπλοί κλώνοι του DNA μπορούν ταυτόχρονα να αναγνωριστούν και να διασπαστούν σχεδόν στην ίδια θέση για να σχηματιστούν θραύσματα DNA επίπεδου άκρου ή θραύσματα DNA κολλώδους άκρου με 1-2 νουκλεοτίδια να προεξέχουν.
Χημική Δομή
Ορισμός μονάδας
Μία μονάδα ορίζεται ως η ποσότητα του ενζύμου που θα αποικοδομήσει πλήρως 1 μg DNA του pBR322 σε 10 λεπτά στους 37°C.
Προσδιορισμός
Δοκιμαστικά είδη | Προδιαγραφές |
Καθαρότητα (SDS-PAGE) | ≥ 95% |
Δραστηριότητα Rnase | Χωρίς υποβάθμιση |
Μόλυνση gDNA | ≤ 1 αντίγραφο/μL |
Μεταφορά και αποθήκευση
Μεταφορά:Αποστέλλεται κάτω από 0 °C
Αποθήκευση:Φυλάσσεται στους -25~-15°C
Συνιστώμενη επαναληπτική δοκιμή Ζωής:2 χρόνια