2×PCR Master Mix (χωρίς βαφή)
Το PCR Master Mix είναι ένα είδος συμβατικού προαναμεμειγμένου διαλύματος PCR το οποίο είναι έτοιμο για χρήση, συμπεριλαμβανομένης της πολυμεράσης Taq DNA, του μίγματος dNTP MgCl2 και του βελτιστοποιημένου ρυθμιστικού διαλύματος.Κατά τη διάρκεια της αντίδρασης, μόνο ο εκκινητής και το εκμαγείο μπορούν να προστεθούν για ενίσχυση, γεγονός που απλοποιεί σημαντικά τα βήματα λειτουργίας του πειράματος.Αυτό το προϊόν περιέχει εξαιρετικούς σταθεροποιητές και μπορεί να αποθηκευτεί για 3 μήνες στους 4℃.Το προϊόν PCR έχει προεξοχή 3'-dA και μπορεί εύκολα να κλωνοποιηθεί σε φορέα Τ.
Συνθήκες αποθήκευσης
Το προϊόν πρέπει να φυλάσσεται στους -25℃~ -15℃ για δύο χρόνια.
Προδιαγραφές
Πιστότητα (έναντι Taq) | 1× |
Hot Start | No |
Εξέχω | 3′-Α |
Πολυμεράση | Taq DNA Polymerase |
Μορφή αντίδρασης | SuperMix ή Master Mix |
Ταχύτητα Αντίδρασης | Πρότυπο |
Τύπος Προϊόντος | PCR Master Mix (2×) |
Οδηγίες
1.Σύστημα Αντίδρασης
Συστατικά | Μέγεθος (μL) |
Πρότυπο DNA | Κατάλληλος |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | Μέχρι 50 |
2.Πρωτόκολλο ενίσχυσης
Βήματα κύκλου | Θερμοκρασία (°C) | χρόνος | Κύκλοι |
Προ-μετουσίωσης | 94 ℃ | 5 λεπτά | 1 |
Μετουσίωσης | 94 ℃ | 30 δευτ | 35 |
Ανόπτηση | 50-60 ℃ | 30 δευτ | |
Επέκταση | 72 ℃ | 30-60sec/kb | |
Τελική επέκταση | 72 ℃ | 10 λεπτά | 1 |
Σημειώσεις:
1) Χρήση προτύπου: 50-200 ng γονιδιωματικού DNA.0,1-10 ng πλασμιδικού DNA.
2) Mg2+συγκέντρωση: Αυτό το προϊόν περιέχει 3 mM MgCl2 κατάλληλο για τις περισσότερες αντιδράσεις PCR.
3) Θερμοκρασία ανόπτησης: Ανατρέξτε στη θεωρητική τιμή Tm των Primers.Η θερμοκρασία ανόπτησης μπορεί να ρυθμιστεί σε 2-5 ℃ χαμηλότερη από τη θεωρητική τιμή του ασταριού.
4) Χρόνος παράτασης: Για μοριακή ταυτοποίηση, συνιστάται 30 sec/kb.Για την κλωνοποίηση γονιδίων, 60sec/kb συνιστάται.
Σημειώσεις
1.Για την ασφάλεια και την υγεία σας, παρακαλούμε να φοράτε παλτό εργαστηρίου και γάντια μιας χρήσης για τη λειτουργία.
2.Μόνο για ερευνητική χρήση!